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      奧豪斯公司實驗室對薏苡莖總堿抗氧化性研究


      摘要目的:研究薏苡莖總堿的抗氧化性。方法:用奧豪斯電子天平稱取定量,在用超聲輔助法( 以75%%u4E59醇作為溶劑) 和減壓蒸發輔助法( 利用旋轉蒸發儀) 提取薏苡莖總堿;用普魯士法測定其對Fe3 的還原能力;用紫外分光光度法測定其清除DPPH 自由基的能力、清除超氧自由基的能力、用丁基羥基茴香醚 作對照測定其對Fe2 的螯合能力。結果:薏苡莖總堿有較強的還原Fe3 的能力、清除DPPH 自由基的能力、清除超氧自由基的能力、螯合金屬離子Fe2 的能。結論:薏苡莖總堿具有較強的抗氧化性。
        生物堿是自然界中廣泛存在的一大類堿性含氮有機化合物,大多具有較復雜的氮雜環結構,并具有廣泛的生理活性和堿性,是許多藥用植物的有效成分。薏苡為禾本科薏苡屬植物薏苡的干燥全草。薏苡仁為禾本科植物薏苡的干燥成熟種仁,自1963 年版的《中國藥典》就已開始收載。薏苡具有利水滲濕、健脾止瀉、除痹、排膿和解毒散結等功能,主治水腫、腳氣、小便不利、脾虛泄。本實驗從薏苡莖中提取總堿,研究其抗氧化作用,為開發利用廣西壯藥薏苡提供理論依據。
        1 材料、試劑與設備
        1. 1 材料薏苡莖干品( 采自廣西百色市西林縣) 。
        1. 2 試劑DPPH 、菲洛嗪、其它所用試劑均為分析純。
        1. 3 主要儀器CP64型電子天平( 奧豪斯儀器上海有限公司) 、SHZ-III 循環水式真空泵( 上海亞榮生化儀器廠) 、RE - 3000 A型旋轉蒸發器( 上海亞榮生化儀器廠) 、HHS - 21 - 4 電熱式恒溫水浴、756PC 可見分光光度計( 上海舜宇恒平科學儀器有限公司) 、KQ5200DB 型數
      控超聲波清洗器( 昆山市超聲儀器有限公司) 。
        2 試驗方法
        2. 1 薏苡莖總堿的提取
        用奧豪斯CP64型電子天平稱取取粉碎的薏苡莖干品20g于圓底燒瓶中,用75% %u4E59醇超聲提取,抽濾,減壓濃縮得浸膏。分別取總堿浸膏,用75%%u4E59醇溶解并定容于100 mL 容量瓶中,配成不同濃度的總堿溶液備用。
        2. 2 薏苡莖總堿體外抗活性氧自由基作用研究。
        2. 2. 1 還原Fe3 的能力采用普魯士蘭法測定樣品還原Fe3 能力。在系列10 mL 具塞比色管中依次加入不同濃度的樣品溶液2. 0 mL,0. 2 mol /LpH6. 6 磷酸鹽緩沖液2. 0 mL和1% %u94C1氰化鉀2. 0mL,混勻后置于50 ℃水浴中反應20 min,然后加入10% %u4E09氯乙酸2. 0 mL,混勻,如溶液渾濁離心3 000 r /min) 10 min,取上清液2. 0 mL,加入蒸餾水2. 0 mL和0. 1%%u7684三氯化鐵溶液0. 5 mL,混勻,以試劑空白作參比,在700 nm 處測定吸光度值,吸光度值增加表明還原力增強。隨著薏苡莖總堿溶液濃度的增大,吸光度也隨之增大,表明其對Fe3 的還原能力增加。當總堿溶液濃度為2 mg /mL 時,吸光度為0. 942。
        2. 2. 2 清除DPPH 自由基能力試驗DPPH 在有機溶劑中是一種穩定的自由基,其醇溶液呈紫色,具有單一電子,能接受一個電子或氫離子,與氧化劑發生反應,顏色發生變化,由深紫色變為淡黃色,在波長為517 nm 下具有最大吸收??捎米贤夥止夤舛确y定。以高濃度逐漸稀釋的方式檢測不同樣品溶液對自由基的清除率,以自由基清除率為50% %u65F6樣品的濃度( IC50) 來衡量樣品對自由基的清除能力。IC50越小,表明樣品清除自由基的能力越強。取新配制的( 6



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