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      奧豪斯電子天平、移液器在朝醫方千金文武湯提取中的應用


      目前臨床使用朝醫經典方劑千金文武湯(《東醫四象新編》)用于治療糖尿病具有顯著療效。本文以該方劑藥味中共有活性部位總黃酮的提取量為指標,優選最佳提取工藝。
        儀器與試藥
        756PC型紫外可見分光光度計(上海恒平);DV114C型電子天平(奧豪斯儀器上海有限公司);蘆?。ㄙ徸灾袊幤飞镏破窓z驗所,批號:818-9401);藥材為:葛根、黃芩、山藥、麥門冬、五味子、桔梗、白芷;水為純水,其他試劑均為分析純。
        方法與結果
        1.處方分析:千金文武湯處方由葛根、山藥、黃芩、麥門冬、五味子、桔梗、白芷七味藥組成,具有補肺斂肺、潤燥化痰、生津解表的功效,主要用于太陰人下消,小便不禁等證,目前朝醫臨床常用其治療DM。方中主藥葛根中黃酮類成分葛根素、黃芩中黃酮類成分黃芩苷有明確
      降血糖或降血脂作用。故以葛根、黃芩為主,結合其他藥味,選擇總黃酮為該方劑提取的指標成分??傸S酮含量測定方法學考察:采用紫外分光光度法,建立總黃酮含量的測定方法。
        2.溶液的配制。
        對照品溶液:用奧豪斯電子天平精密稱取干燥至恒重的蘆?。担罚恚?,用適量水溶解后定容至100ml,即得。樣品溶液:奧豪斯電子天平稱取處方量藥材,加入12倍量水浸泡1h,加熱煎煮提?。保?,濾過,再加入10倍量水提?。保?,濾過,合并濾液,定容至1?。玻埃埃恚?,即得。供試品溶液:在用奧豪斯移液器精密吸取樣品溶液1ml于蒸發皿中,加1g聚酰胺粉吸附,于恒重干燥箱中,50℃揮干溶劑,轉入層析柱,用30ml石油醚洗脫,棄石油醚,再用30ml甲醇洗脫總黃酮,收集洗脫液,減壓蒸干,殘渣用甲醇溶液溶解并定容至25ml即得。
        3.線性關系的考察:奧豪斯移液器精密量取對照品溶液1、2、3、4、5、6、7、8、9、10ml至10ml容量瓶中,用水定容,在256nm處測定吸光度。以吸光度值(Y)對濃度(X)進行回歸,得到其回歸方程。結果表明,對照品溶液濃度與吸光度值呈良好的線性關系。
        4.精密度考察:用奧豪斯移液器精密量取上述對照品溶液,重復測定5次,RSD為0.77%,表明儀器精密度良好。
        5.穩定性考察:用奧豪斯移液器精密量取同一供試品溶液,分別于0、2、4、8、12、24h進行測定,RSD為0.91%,表明供試品溶液在24h內穩定。
        6.重現性考察:用奧豪斯電子天平精密稱取同一批樣品溶液5份,按供試品溶液項下制備,按上述方法測定,RSD 為0.95%,表明本法重現性良好。
        7.加樣回收率考察:用奧豪斯移液器精密量取已知含量的樣品溶液共6份,分別精密加入對照品適量,按供試品溶液項下制備,測定,計算回收率。本法平均回收率為97.77%,RSD為1.54 %,表明本法準確度較好,方法可行。
        8.樣品濃度與吸光度線性關系考察:精密量?。保恚鞓悠啡芤?,用蒸餾水定容至50ml,分別精吸1、2、3、4、5ml置10ml容量瓶中,用蒸餾水定容,在256nm處測吸光度值。以吸光度值(Y)對濃度(X)進行回歸,得其回歸方程。結果表明,樣品濃度與吸光度值呈良好的線性關系,表明以總黃酮含量作為樣品測定指標合理、可行。
        提取工藝優化
        1.試驗方案的設計:采用正交設計試驗,以樣品中總黃酮含量為評價指標,優選最佳提取工藝。復方制劑實際生產中提取次數一般為2次,所以在提取工藝中,提取時間、溶劑用量是影響總黃酮提取量的主要因素。因此,選用L4(22)正交設計安排實驗。結果分析:以各實驗組總黃酮的含量為指標進行分析。結果表明,在所選因素的水平范圍內,因素A(提取時間)、B(溶劑用量)對總黃酮提取量均無顯著性影響。通過正交試驗所得結果進行直觀選擇,最佳提取工藝為A2B1,即提取時間為90min/45min,溶劑用量為12倍/10倍。
        2.驗證性實驗:按照上述優化提取工藝進行提取,重復進行3次平行試驗,測得樣品中總黃酮含量為(3.532



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